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食品大腸菌群快速檢驗紙片

1、原理及適用范圍
將乳糖膽鹽選擇性培養(yǎng)基和TTC顯色劑加載在紙片上，經培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。食品大腸菌群檢驗紙片法與國標法中的九管法相對應，將原來幾步的試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。執(zhí)行標準：食品安全國家標準食品微生物檢驗大腸菌群計數MPN計數法（GB/T 4789.3--2010）。
       適用于各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測定。
2、操作方法
       2.1、樣品處理：按無菌操作稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣瓶或均質杯中，經充分振搖做成1：10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調節(jié)。用1mL滅菌吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖試管制成1：100的樣品勻液。根據對樣品污染狀況的估計，按上述操作，一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換一支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min。
       2.2、接種
         2.2.1、選取兩個稀釋度進行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料采用原液和1：10兩個稀釋度。本品每份由三片大紙片（接10mL，袋中二片疊放算作一大片），六片小紙片（接1mL）組成。
         2.2.2、用滅菌吸管吸取10mL 1：10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中（相當于接樣品1g），吸透后平放，做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.1g），做三個重復。再另取一支1mL滅菌吸管吸取1mL 1：100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.01g），做三個重復。
       2.3、培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15～24h。

檢測結果圖例：

3、大腸菌群最可能數（MPN）的報告
       3.1 若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。
        3.2 記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據《食品飲料大腸菌群MPN表》查出相應的大腸菌群數。
        3.3 如接種的第一個梯度為原液，應將表上查出的結果除以10。
4、注意事項
         新的國家標準所用的單位改為每克（或毫升）檢樣中大腸菌群最可能數，標準的接種量為0.333g（mL），MPN表也是由此而設計。而使用本品的標準接種量為3.33g（mL），大紙片接種10mL 1：10樣品勻液相當于1g樣品，因而表內數字應相應降低10倍。飲料樣品的接種量為33.3mL，大紙片接種10mL樣品原液，表內數字應降低100倍。

附表食品、飲料大腸菌群（MPN）檢索表

陽性紙片數			MPN 100mL（g）	95%可信限
1 mL(g)×3	0.1 mL(g)×3	0.01 mL(g)×3	MPN 100mL（g）	下限	上限
0 0 0 0	0 0 0 0	0 1 2 3	＜30 30 60 90	＜5	90
0 0 0 0	1 1 1 1	0 1 2 3	30 60 90 120	＜5	130
0 0 0 0	2 2 2 2	0 1 2 3	60 90 120 160
0 0 0 0	3 3 3 3	0 1 2 3	90 130 160 190
1 1 1 1	0 0 0 0	0 1 2 3	40 70 110 150	＜5 10	200 210
1 1 1 1	1 1 1 1	0 1 2 3	70 110 150 190	10 30	230 360
1 1 1 1	2 2 2 2	0 1 2 3	110 150 200 240	30	360
1 1 1 1	3 3 3 3	0 1 2 3	160 200 240 290
2 2 2 2	0 0 0 0	0 1 2 3	90 140 200 260	10 30	360 370
2 2 2 2	1 1 1 1	0 1 2 3	150 200 270 340	30 70	440 890
2 2 2 2	2 2 2 2	0 1 2 3	210 280 350 420	40 100	470 1500
2 2 2 2	3 3 3 3	0 1 2 3	290 360 440 530
3 3 3 3	0 0 0 0	0 1 2 3	230 390 640 950	40 70 150	1200 1300 3800
3 3 3 3	1 1 1 1	0 1 2 3	430 750 1200 1600	70 140 300	2100 2300 3800
3 3 3 3	2 2 2 2	0 1 2 3	930 1500 2100 2900	150 300 350	3800 4400 4700
3 3 3 3	3 3 3 3	0 1 2 3	2400 4600 11000 ≥24000	360 710 1500	13000 24000 48000

5、保存條件
本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現冷凝水，最好在拆封前將整包回溫至室溫.

微生物快速檢測系列產品:


菌落總數快速測試紙片	大腸菌群快速測試片	食品大腸菌群檢驗紙片	冷飲大腸菌群檢驗卡

水質大腸菌群檢驗紙片	餐具大腸菌群檢驗紙片	霉菌酵母菌快速檢驗卡	大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片

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附表 食品、飲料大腸菌群（MPN）檢索表

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160 200 240 290

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90 140 200 260

10 30

360 370

2 2 2 2

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2 2 2 2

2 2 2 2

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210 280 350 420

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470 1500

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2100 2300 3800

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附表食品、飲料大腸菌群（MPN）檢索表

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